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水分胁迫柠条锦鸡儿叶片均一化全长cDNA文库的构建及EST分析

文献类型: 中文期刊

作者: 郭九峰 1 ; 孙国琴 2 ; 乔慧蕾 2 ;

作者机构: 1.内蒙古大学

2.内蒙古农牧业科学院自治区农作物生物技术育种中心

关键词: 柠条锦鸡儿;干旱处理;均一化全长cDNA文库;EST分析

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2012 年 27 卷 03 期

页码: 70-74

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 柠条是包括内蒙古在内干旱荒漠草原上的优势建群植物,具有极强的耐旱(寒)力,为了研究其抗逆机理,挖掘和利用其抗旱基因,用Trizol法从经过干旱处理的柠条当年新生幼嫩枝叶中提取总RNA,分离纯化mRNA,采用SMART技术反转录合成双链cDNA,DSN技术进行均一化,构建了柠条全长cDNA文库。经检验,文库的滴度为1.5×106 cfu/mL,重组率为93.75%,90%以上插入片段的长度为1.0~2.0 kb。从文库中随机挑取3200个克隆进行5'测序,得到3020个有效EST,合成2429个unigenes,其中,singlets 2229条,占总有效序列的91.76%,经与数据库比对,发现了脱水素、抗旱相关转录因子等多个抗旱相关基因。

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