文献类型： 中文期刊

作者： 李彬 ¹ ; 杜露平 ¹ ; 何孔旺 ¹ ; 孙冰 ¹ ; 倪艳秀 ¹ ; 温立斌 ¹ ; 张雪寒 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： 猪Hokovirus;环介导等温扩增(LAMP);检测方法

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2014 年 27 卷 02 期

页码： 859-863

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为提高猪Hokovirus(PHoV)检测的敏感性和简便性,本研究采用环介导等温扩增(LAMP)技术,建立了一种敏感、特异、快速、简便、实用的检测PHoV的技术。针对PHoV VP1/2基因保守区设计4条引物,进行LAMP扩增,对扩增反应进行优化并检测其敏感性和特异性。结果表明,所建立的方法最佳反应时间为60 min,反应温度为65℃,该方法具有良好的特异性,与其它常见动物病毒(PRRSV、PCV2、CSFV、PRV、PPV、JEV)无交叉反应,对PHoV的最低检出量为10拷贝,其敏感性是PCR方法的10倍,且通过加入荧光染料可直接判定结果。研究表明,该方法特异性强、敏感性高,且操作简便、检测成本低、检测时间短,不需要特殊的仪器,本研究建立的LAMP方法可以作为PHoV在临床上的一种检测技术。