文献类型： 中文期刊

作者： 朱寅初 ¹ ; 王宏宇 ² ; 云涛 ¹ ; 华炯钢 ¹ ; 叶伟成 ¹ ; 倪征 ¹ ; 陈柳 ¹ ; 张存 ¹ ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

2.浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所

关键词： 鹅星状病毒;分离鉴定;衣壳蛋白;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2022 年 34 卷 010 期

页码： 2149-2159

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 鹅星状病毒(GAstV)是当前鹅养殖业的重要病原,易引起雏鹅内脏痛风症状和死亡,造成巨大经济损失.于浙江省内采集30份病料,进行核酸检测、病原分离和测序,并克隆其ORF2序列至pET-28 a原核表达载体,转化BL21菌株后经诱导获得衣壳蛋白,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.结果显示,临床死亡雏鹅剖检均发现典型内脏痛风症状,核酸检测鉴定为鹅星状病毒阳性,且出现不同基因型鹅星状病毒混合感染情况.共分离得到ZJC14和ZJLD20两个毒株,其中,ZJLD20在鹅胚和LMH细胞中均稳定增殖,但ZJC14并不能适应LMH细胞.病毒基因组测序显示,ZJC14与ZJLD20亲缘关系较远,ZJC14属于GAstV-Ⅰ基因型,而ZJLD20为GAstV-Ⅱ基因型.重组表达载体pET28a-ORF2诱导后获得纯化目的蛋白,经免疫成功制备兔源多克隆抗体,该抗体可与目的蛋白结合.此外,间接免疫荧光和Western-blot试验结果显示,ZJLD20衣壳蛋白制备的多克隆抗体可与病毒结合反应.研究成果有利于后续对该病原致病能力的研究,同时,试验制备的ORF2衣壳蛋白与多克隆抗体为鹅源星状病毒感染的诊断试剂开发奠定了基础.