文献类型： 中文期刊

作者： 包黎娟 ¹ ; 刘育含 ¹ ; 马毅 ¹ ; 安小鹏 ¹ ; 张月 ¹ ; 张梦 ¹ ; 王建刚 ¹ ; 堵斌 ¹ ; 李广 ¹ ; 曹斌云 ¹ ;

作者机构： 1.西北农林科技大学动物科技学院;天津市畜牧兽医研究所;陕西佰傲再生医学有限公司

关键词： miR-92a;奶山羊;乳腺上皮细胞;转录组测序

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2020 年 01 期

页码： 137-149

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： miRNAs是对哺乳动物乳腺组织发育及泌乳机能进行调控的重要因子。本研究依据已有的关中奶山羊乳腺组织miRNA表达谱,选择不同泌乳时期差异表达的miR-92a为研究对象,探究miR-92a对山羊乳腺上皮细胞(GMEC)增殖及凋亡的调控作用,并挖掘其潜在的调控基因。采用荧光定量PCR、MTT检测、EdU检测及流式细胞术,检测miR-92a在不同泌乳时期乳腺组织的表达情况,并在细胞水平检测miR-92a对乳腺上皮细胞增殖、凋亡及细胞周期的调控作用。利用RNA-seq技术,分析过表达miR-92a乳腺上皮细胞中的差异表达基因。qRT-PCR结果显示,miR-92a在奶山羊泌乳初期乳腺组织中表达量极显著高于泌乳中期(P<0.01),表明miR-92a可能对奶山羊泌乳性状有重要的调控作用。GMEC过表达miR-92a后,试验结果显示:与NC对照组比较,miR-92a过表达组的EdU阳性细胞数极显著减少(P<0.01),S期的细胞数显著下降、G1期的细胞数显著增加,同时miR-92a组的凋亡细胞数目显著增加(P<0.05)。采用RNA-seq,构建了miR-92a过表达mRNA文库,发现下调基因54个,上调基因160个。GO terms及KEGG通路分析显示差异表达基因调控乳腺上皮细胞多种生物学功能。以上结果表明miR-92a促进GMEC凋亡、抑制其增殖,测序结果进一步证明miR-92a对奶山羊乳腺发育及泌乳性能具有潜在的调控作用。