文献类型： 中文期刊

作者： 杜翔斐 ¹ ; 彭庆务 ² ; 江彪 ² ; 金庆敏 ² ; 姚春鹏 ² ; 林毓娥 ² ; 何晓明 ² ; 王永飞 ³ ;

作者机构： 1.暨南大学生物工程学系;广东省农业科学院蔬菜研究所;广东省蔬菜新技术研究重点实验室

2.;暨南大学生物工程学系;广东省农业科学院蔬菜研究所;广东省蔬菜新技术研究重点实验室

3.;暨南大学生物工程学系;广东省农业科学院蔬菜研究所;广东省蔬菜新技术研究重点实验室;

关键词： 节瓜;CqWRKY1;农杆菌介导;遗传转化;离体培养

期刊名称： 核农学报

ISSN： 1000-8551

年卷期： 2018 年 06 期

页码： 1060-1069

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立和优化节瓜的遗传转化体系,并高效地完成CqWRKY1基因的遗传转化,本研究以节瓜A39为材料,通过RT-PCR技术克隆了节瓜CqWRKY1基因,采用Gateway同源重组法构建了pEarleyGate101-CqWRKY1超表达载体,以节瓜子叶节为外植体,利用农杆菌介导的遗传转化法进行转化。结果表明,子叶节不定芽诱导的最适培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)6-BA+1 mg·L~(-1)ABA,诱导率可达76.17%;生根的最佳培养基为1/2MS+0.5 mg·L~(-1)IAA;农杆菌侵染的最佳条件为农杆菌浓度OD_(600)为0.3、侵染时间为10 min、共培养时间为3 d;最佳的抑菌抗生素为500 mg·L~(-1)的头孢霉素。本研究在181株拟转基因组培苗中共得到76株阳性T_0转基因组培苗,其中共有37株移栽成活。PCR结果表明,CqWRKY1已成功整合到37株转化植株的基因组中。本研究结果为进一步研究CqWRKY1基因的功能奠定了一定的理论基础。