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第二代抗草甘膦大豆PCR检测方法研究

文献类型: 中文期刊

作者: 李飞武 1 ; 李葱葱 2 ; 邢珍娟 2 ; 刘娜 2 ; 康岭生 2 ; 宋新元 2 ; 邵改革 2 ; 张明 2 ;

作者机构: 1.吉林省农业科学院

2.吉林省农业科学院,农业部转基因植物环境安全监督检验测试中心

关键词: 转基因生物;Roundup RReady2YieldTM;转化体特异性PCR

期刊名称: 大豆科学

ISSN: 1000-9841

年卷期: 2009 年 28 卷 02 期

页码: 296-300

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立转基因大豆Roundup RReady2YieldTM(RR2Y)转化体特异性定性PCR检测方法,以lectin基因作为内参照基因,根据RR2Y外源插入片段5’端与植物基因组连接区序列设计特异性引物,从RR2Y中特异性地扩增出223bp的预期产物。对该方法进行重现性、特异性、灵敏度、稳定性和可重复性测试,结果显示:该方法能够特异性检测出RR2Y转化体;将100%RR2Y基因组DNA用A3244基因组DNA进行梯度稀释,以100ngDNA为模板,该方法的检测灵敏度达到0.05%,约为40个起始模板拷贝;以RR2YDNA含量为10%、1%、0.1%的样品为模板,进行稳定性和可重复性,假阴性率为0。结果表明:此方法适用于RR2Y的转化体特异性定性PCR检测。

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