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白背飞虱酵母双杂交cDNA文库的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 薛进 1 ; 李静 1 ; 羊健 1 ; 唐彦 1 ; 梁瑶 1 ; 陈剑平 1 ; 张恒木 1 ;

作者机构: 1.植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室湖南农业大学植物保护学院病毒研究所;浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所;湖南农业大学东方科技学院

关键词: 白背飞虱;南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV);Gateway技术;酵母双杂交;cDNA文库

期刊名称: 浙江农业学报

ISSN: 1004-1524

年卷期: 2017 年 29 卷 12 期

页码: 2060-2067

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 白背飞虱(Sogatella furcifera Horváth)作为一种迁飞性害虫,不仅自身危害水稻,而且以持久性方式传播南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)。为了研究白背飞虱与SRBSDV之间的相互作用,需要构建一个高质量的酵母筛选文库,试验利用Gateway技术构建了白背飞虱cDNA酵母表达文库,检测分析显示,白背飞虱初级文库库容量约为1.72×10~7CFU,cDNA插入片段主要分布在500~2 000 bp,重组率约为95.8%;次级文库库容量约为1.73×10~7CFU,cDNA插入片段主要分布在400~2 000bp,重组率为100%;Y187酵母菌株的白背飞虱酵母双杂交cDNA文库库容量约5.09×10~7CFU,插入片段大小在750~2 000 bp,重组率100%,再随机挑选36个单克隆进行测序分析,所得结果与Gen Bank数据库比对显示36个克隆中含有22个不同的基因,长度在750~2 000 bp,这些分析表明,该文库可以用于酵母双杂交的后续筛选,为研究白背飞虱与SRBSDV之间的互作奠定了基础。

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