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黄花蒿醇提物对奶牛乳腺细胞中共轭亚油酸合成相关酶基因表达的作用

文献类型： 中文期刊

作者： 王丽芳 1 ; 张兴夫 1 ;

作者机构： 1.内蒙古自治区农牧业科学院

关键词： 黄花蒿乙醇提取物;奶牛乳腺上皮细胞;SCD;ACACA;FASN;LPL

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2019 年 18 期

页码： 3271-3278

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】通过奶牛乳腺上皮细胞体外培养试验,研究黄花蒿乙醇提取物对乳腺上皮细胞中与共轭亚油酸(CLA)合成相关酶的基因SCD表达的影响,探讨其对乳脂肪合成相关酶ACACA和FASN基因以及与脂肪转运相关酶LPL基因表达的影响,旨在从乳腺层次探明黄花蒿乙醇提取物对乳中CLA合成的部分作用机制。【方法】将采自于健康泌乳中期荷斯坦奶牛的乳腺组织用保温盒带回实验室,在无菌条件选取腺泡较多的深层组织,采用胶原酶消化法获得乳腺上皮细胞,放于37℃,CO2浓度为5%的培养箱中进行原代培养。试验所用的细胞是经过复苏的第二代细胞,待细胞复苏后,以3×104个/mL的密度接种细胞到24孔板中,分别置于37℃的5%CO2培养箱中培养,采用台盼蓝计数法每天进行一次计数,设3个重复,连续7 d,未计数组每2天换液一次,绘制细胞生长曲线。另外,待细胞生长至对数增殖期,更换新鲜培养液,随机分为4组,即培养液中黄花蒿提取物的浓度为0、3.0、6.0、12.0 mg·L-1,提取物作用时间均为48 h,检测不同浓度黄花蒿提取物对与脂肪酸合成相关酶SCD、ACC、FAS、LPL基因表达量的影响。每个处理3个重复。【结果】使用倒置显微镜观察,乳腺上皮细胞形态呈铺路石样;在3×104个/mL的接种密度下,细胞生长曲线呈S型,在1—2d乳腺上皮细胞为潜伏期,3—6d为指数增长期,之后进入平台期,符合一般细胞生长曲线规律,说明培养的乳腺上皮细胞具有正常的增殖能力,可以用于后续的研究;与对照组相比,添加黄花蒿乙醇提取物有增加SCD酶基因表达量的趋势,其中3mg·L-1组显著增加了SCD酶的基因表达量(P<0.05),而6 mg·L-1组和12mg·L-1组虽然增加了SCD酶的基因表达量,但与对照组相比差异不显著(P>0.05);添加黄花蒿乙醇提取物有增加乳腺上皮细胞中ACACA基因表达量的趋势,但与对照组相比差异不显著(P>0.05),且随着添加剂量的增加,有下降趋势;添加黄花蒿乙醇提取物可以增加乳腺上皮细胞中FASN基因表达量,呈剂量依赖型增加,且12mg·L-1组可以显著增加乳腺上皮细胞中FASN基因表达量(P<0.05);添加黄花蒿乙醇提取物有降低乳腺上皮细胞中LPL基因表达量的趋势,呈剂量依赖型降低,且6 mg·L-1组和12mg·L-1组显著降低了乳腺上皮细胞中LPL基因表达量(P<0.05)。【结论】黄花蒿乙醇提取物可以增加奶牛乳腺上皮细胞中SCD、ACACA和FASN酶基因的表达,有利于调控CLA和乳脂肪的生成。

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[1]添加菊科植物黄花蒿乙醇提取物对奶牛乳腺上皮细胞脂肪酸组成的影响. 王丽芳,卢德勋,高民. 2010

[2]黄花蒿提取物生产工艺条件及其对乳中共轭亚油酸(CLA)生成的调控作用. 王丽芳,姚一萍. 2016

[3]黄花蒿提取物对奶牛瘤胃发酵指标的影响. 王丽芳,斯琴毕力格,敖长金. 2018

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[5]黄花蒿提取物对奶牛瘤胃发酵指标的影响. 王丽芳,斯琴毕力格,敖长金. 2018

[6]添加菊科植物黄花蒿乙醇提取物对奶牛乳腺上皮细胞脂肪酸组成的影响. 王丽芳,卢德勋,高民. 2011

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[8]奶牛乳腺上皮细胞不同代数对乳蛋白基因表达的影响. 韩亚南,侯先志,考桂兰,王秀美,杨金丽,高爱武,杨银芬,赵青,高民. 2012

[9]三维模式下培养时间对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白基因表达的影响. 王秀美,侯先志,敖长金,高民,考桂兰,高爱武,兰儒冰,塔娜. 2013

[10]奶牛乳腺上皮细胞的二维和三维培养及培养后酪蛋白基因的表达. 王秀美,侯先志,高爱武,考桂兰,高民,李大彪,兰儒冰,张楠,张艳明,黄清瑞. 2012

[11]油酸对奶牛乳腺上皮细胞内甘油三酯含量和乳脂肪合成相关基因表达的影响. 邢媛媛,李红磊,李大彪,胡红莲,张兴夫,高民. 2017

[12]TNF-α对体外培养奶牛乳腺上皮细胞α-SMA mRNA及蛋白表达的影响. 杨磊,王凤龙,丁玉林,丁旭娜,刘德明,赵占宽. 2013

[13]乙酸钠和β-羟丁酸钠对奶牛乳腺上皮细胞乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响. 塔娜,李红磊,侯先志,考桂兰,高民,李大彪. 2014

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[15]植物提取物复合制剂缓解奶牛乳腺上皮细胞炎症反应的分子机制. 张腾龙,郭晨阳,宋洁,敖长金,王丽芳. 2023

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