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猪流行性腹泻病毒SYBRⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 修金生 1 ; 周伦江 2 ; 陈如敬 3 ; 王隆柏 2 ; 陈小权 1 ;

作者机构: 1.福建农林大学动物科学学院

2.福建省农业科学院畜牧兽医研究所

3.福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心

关键词: 猪流行性腹泻病毒;SYBR GreenⅠ;荧光定量RT-PCR

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2012 年 20 卷 02 期

页码: 160-165

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 参考GenBank上登录的猪流行性腹泻病毒(PEDV)株的ORF3基因序列保守型片段设计特异性引物,建立了检测PEDV的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法。在4.32×102~4.22×107copies范围内,它有很好的线性关系,其扩增相关系数为0.999,扩增效率为99%,扩增产物的熔解曲线只出现1个特异峰,无引物二聚体,熔解温度为82.23℃±0.19℃。它对传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪细小病毒、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪瘟病毒均检测不到荧光信号,表明其特异性强。该方法的组内变异系数为0.05%~0.87%,组间变异系数为0.32%~1.24%,重复性好。结果表明,建立的SYBRⅠ实时荧光定量RT-PCR为PEDV早期感染的诊断及定量分析提供了新的方法。

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