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猪伪狂犬病毒浙江株感染性细菌人工染色体克隆的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 尹文玲 1 ; 尹龙勃 1 ; 叶伟成 2 ; 孙学强 3 ; 姚火春 4 ;

作者机构： 1.西北农业大学动物医学院

2.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

3.南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

4.动物医学学院

关键词： 伪狂犬病毒;细菌人工染色体;感染性克隆;重组病毒

期刊名称： 病毒学报

ISSN： 1000-8721

年卷期： 2010 年 04 期

页码： 330-335

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过同源重组将携带细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)载体和GFP表达框的pHA2质粒序列插入到PRV病毒的UL23(TK)基因内,获得了重组病毒rPRV-HA2;将该重组病毒的环状基因组电转化到感受态细胞EscherichiacoliDH10B,筛选到病毒的感染性克隆PRV BAC(pPRV)。pPRV转染VeroE6细胞可以重新启动病毒的生产性感染,该拯救病毒的细胞病变和体外增殖特性与rPRV-HA2一致。病毒生长曲线表明TK基因的部分删除和BAC载体的插入不会影响病毒在体外的复制。PRV感染性BAC克隆的成功构建,将方便在大肠杆菌内对病毒基因组进行快速、准确的操作,为进一步开展PRV基因功能和病毒载体研究奠定基础。

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