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加州鲈卵泡抑素cDNA的克隆、分析和原核表达

文献类型: 中文期刊

作者: 李胜杰 1 ; 白俊杰 1 ; 叶星 1 ; 劳海华 1 ; 简清 1 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室

关键词: 加州鲈;卵泡抑素;克隆;原核表达

期刊名称: 农业生物技术学报

ISSN: 1006-1304

年卷期: 2007 年 15 卷 05 期

页码: 59-64

收录情况: CSCD

摘要: 采用RT-PCR和RACE技术从加州鲈(Micropterus salmoides)成鱼卵巢总RNA中扩增得到卵泡抑素cDNA。序列分析表明,加州鲈卵泡抑素cDNA全长1444bp,包括开放阅读框966bp,5'非编码区82bp,3'非编码区359bp。该基因编码321个氨基酸,其中信号肽31个氨基酸,成熟肽290个氨基酸。成熟蛋白由4个功能区组成,分别为:N-domain、DomainⅠ、DomainⅡ和DomainⅢ。将加州鲈卵泡抑素氨基酸序列与红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)、草鱼(Ctenopharyngodon idella)、斑马鱼(Danio rerio)、大西洋鲑(Salmo salar)和斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)比较,同源性分别为97%、89%、88%、88%和70%,N-domain氨基酸序列表现出最高的保守性。将成熟肽cDNA插入表达载体pET-32a(+),转化大肠杆菌(Escherichia coli),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测,结果检测到预期分子量约52kD的特异蛋白带,Western blot检测到表达产物,表明成功获得了卵泡抑素的融合蛋白。

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