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马铃薯M病毒衣壳蛋白原核表达和多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

作者： 张春雨 1 ; 李小宇 1 ; 万千 1 ; 夏黎明 1 ; 王忠伟 1 ; 王韬远 1 ; 王永志 1 ;

作者机构： 1.吉林省农业科学院/东北作物有害生物综合治理重点实验室/吉林省农业微生物重点实验室;吉林农业大学生命科学学院;芜湖职业技术学院园林园艺学院

关键词： 马铃薯M病毒;衣壳蛋白;表达纯化;多克隆抗体

期刊名称： 东北农业科学

ISSN：

年卷期： 2017 年 03 期

页码： 27-30

摘要： 本研究利用RT-PCR技术从发病马铃薯植株叶片中克隆马铃薯M病毒(Potato virus M,PVM)的衣壳蛋白全长基因,该基因由912个碱基组成。将其亚克隆到表达载体pET-28b(+)中后,转化大肠杆菌菌株Rosetta。经IPTG诱导处理后,获得的重组蛋白大小约为33 kDa,与预期大小一致。经镍离子亲和层析纯化后免疫日本大耳白兔,制备多克隆抗体,免疫4次后多抗血清效价为1∶64 000。经ELISA和Western blot分析表明,多克隆抗体能够特异性的识别PVM。PVM多克隆抗体的制备为PVM快速检测方法的建立奠定了基础。

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