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不同浓度盐胁迫下枸杞实时荧光定量PCR内参基因的筛选

文献类型: 中文期刊

作者: 张得芳 1 ; 于倩 1 ; 史文君 1 ;

作者机构: 1.青海省农林科学院

关键词: 宁夏枸杞;黑果枸杞;内参基因;qRT-PCR;盐胁迫

期刊名称: 沈阳农业大学学报

ISSN: 1000-1700

年卷期: 2022 年 005 期

页码: 581-589

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 合适的内参基因是实时荧光定量PCR反应准确与否的重要前提。选择茄科植物常用的5个内参基因(GAPDH、Actin、EF1α、UBI、18S)为候选基因,以不同浓度NaCl胁迫后的宁夏枸杞(Lycium barbarum)和黑果枸杞(Lycium ruthenicum)幼苗叶片为试验材料进行qRT-PCR反应,通过GeNorm、Normfinder和BestKeeper软件对这些内参基因的稳定性进行分析排序,从而筛选出最适合枸杞试验研究的内参基因。结果表明:利用GeNorm软件分析荧光定量结果后发现宁夏枸杞和黑果枸杞中都是Actin和GAPDH基因作为内参基因的表达较稳定;NormFinder软件分析结果发现宁夏枸杞中UBI稳定性最好,而在黑果枸杞中Actin基因最稳定;BestKeeper软件分析得出,在宁夏枸杞和黑果枸杞中均为Actin基因的稳定性最好。综合以上结果,在不同浓度的盐胁迫处理条件下,Actin基因的表达稳定性最好,是最适合用于钠离子胁迫下宁夏枸杞、黑果枸杞qRT-PCR分析研究的内参基因,有利于保证后续试验结果的准确性和可靠性。

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