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猪伪狂犬病毒野毒株SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR诊断试剂盒的研制

文献类型： 中文期刊

作者： 余波 1 ; 周思旋 1 ; 谭诗文 1 ; 徐景峨 1 ; 史开志 1 ; 杨莉 1 ;

作者机构： 1.贵州省畜牧兽医研究所

关键词： 猪伪狂犬病毒;野毒株;gE基因;荧光定量PCR;诊断试剂盒

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2014 年 43 卷 06 期

页码： 128-131+144

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因序列设计特异性的引物,PCR扩增获得PRV gE基因片段,构建重组质粒pMD18-T-gE,作为阳性标准品。对SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应条件进行优化,建立猪PRV SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR诊断方法,研制诊断试剂盒。扩增产物的熔解曲线分析结果显示只出现单特异峰,无引物二聚体,对猪圆环病毒(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)、PRV(gE基因缺失株)、猪源E.coli、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)均无阳性信号扩增,且重复性好,灵敏度可达2.3×101拷贝/μL。结果表明,研制的PRV野毒株SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR试剂盒特异、灵敏、快速、重复性好,适于伪狂犬病毒临床样品的检测。

  • 相关文献

[1]猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型和猪黄痢混合感染的诊治实例. 余波,谭诗文,冉懋韬,徐景峨. 2013

[2]弗氏柠檬酸杆菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR诊断方法的建立及耐药性分析. 王芳,康超,李永霞,余波,周思旋,罗永成,马永兵. 2016

[3]大鲵柱状黄杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR诊断试剂盒的研制. 余波,罗永成,徐景峨,周思旋,杨莉,马永兵. 2014

[4]大鲵致病性嗜水气单胞菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR诊断试剂盒的研制. 余波,罗永成,马永兵,徐景峨,周思旋. 2014

[5]鸭源NF-κB1基因荧光定量PCR方法建立及其初步应用. 张飘,贺欣薇,杨霞,曾茂芹,刘妍罕,张扬子,杨颖,温贵兰,程振涛,文明. 2021

[6]JAK-STAT信号通路JAK2、STAT3和SOCS1基因在鸭肠炎病毒感染中各组织的表达变化. 张飘,龙立书,洪猛,华敏,杨霞,曾茂芹,刘妍罕,张扬子,杨颖,温贵兰,程振涛,李涛,文明. 2021

[7]贵州松桃县猪常见疫病流行病学调查. 齐婧,张静,赵春萍,卢昱希,谭娅,张雄,王婧,周思旋,史开志. 2023

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