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次黄嘌呤核苷酸脱氢酶对猪链球菌2型GN061215生物学特性及蛋白质表达的影响

文献类型: 中文期刊

作者: 周俊明 1 ; 何孔旺 1 ; 倪艳秀 1 ; 张雪寒 1 ; 杨志彪 2 ; 祝昊丹 1 ; 温立斌 1 ; 俞正玉 1 ; 茅爱华 1 ; 吕立新;

作者机构: 1.农业部兽用生物制品工程技术重点实验室

2.上海交通大学农业与生物学院

关键词: 猪链球菌2型;次黄嘌呤核苷酸脱氢酶;核糖体蛋白质;表达谱芯片

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2013 年 29 卷 001 期

页码: 114-120

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了了解次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)对猪链球菌2型GN061215致病力的影响机制,利用同源重组技术,敲除猪链球菌2型GN061215的impdh基因,重组后的GN061215命名为GN061215(△IMPDH),比较GN061215与GN061215(△IMPDH)培养特性、生化特性、致病力以及基因转录水平差异.结果显示impdh基因敲除后,引起GN061215生长曲线迟缓期延长,降低了GN061215生长曲线平台期OD600峰值,同时截短了GN061215菌株成链长度;GN061215、GN061215(△IMPDH)对46种代谢底物利用能力一致,对2种代谢底物利用存在差异;GN061215(△IMPDH)对Balb/c小鼠的致病力较GN061215菌株有一定程度的下降.SDS-PAGE显示GN061215(△IMPDH)菌体的粗提蛋白质条带较GN061215有显著减少;基因芯片比较GN061215、GN061215(△IMPDH)基因转录差异发现,下调基因中存在36个关联核糖体大、小亚基合成的基因,而在上调基因中不存在该类基因,表明impdh基因的丢失影响了GN061215菌株核糖体大、小亚基的合成,进而显著减少了GN061215菌株菌体蛋白质的表达,这可能与GN061215菌株毒力的下降有关.

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