文献类型： 中文期刊
作者： 王小明 1 ; 王健华 2 ; 冯团诚 2 ; 张雨良 2 ; 吴育鹏 1 ; 刘志昕 2 ;
作者机构： 1.海南大学环境与植物保护学院
2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所
关键词： 黄瓜花叶病毒;2b基因;自激活;大肠杆菌双杂交
期刊名称： 热带作物学报
ISSN： 1000-2561
年卷期： 2010 年 31 卷 07 期
页码： 1115-1119
收录情况： CSCD
摘要： 2b蛋白是黄瓜花叶病毒与植物寄主相互作用的一种重要多功能蛋白。用PCR方法扩增目的基因2b,经酶切、连接将其克隆至带有λcI基因的pBT载体上,构建与λcI基因融合的表达载体pBT-CMV 2b,转化大肠杆菌XL1-Blue MRF′报告菌株,用IPTG诱导表达黄瓜花叶病毒2b基因。Western blot分析结果表明,2b-λcI融合蛋白已成功表达,大小约为38 ku,与预期大小一致。pBT-CMV 2b与空质粒pTRG共转化XL1-Blue MRF′报告菌株,同时以pBT空质粒和pTRG-Gal11p共转化作为对照。结果显示,CMV 2b蛋白未产生自激活作用,从而为利用大肠杆菌双杂交系统筛选与2b蛋白相互作用的蛋白质研究奠定基础。
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