文献类型： 中文期刊

作者： 薛智慧 ¹ ; 郭鑫 ¹ ; 李水莲 ¹ ; 周焕焕 ¹ ; 陈洪波 ¹ ; 任红艳 ² ; 张晶 ¹ ;

作者机构： 1.武汉轻工大学动物科学与营养工程学院

2.动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室

关键词： 猪;副猪嗜血杆菌;3D4/21猪肺泡巨噬细胞;m6A甲基化;炎症

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医(上半月)

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2022 年 004 期

页码： 71-75

收录情况： 北大核心

摘要： 为了研究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)血清5型刺激3D4/21猪肺泡巨噬细胞对炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8),以及m6A甲基化修饰相关基因METTL3、METTL14、WTAP、YTHDF2和FTO表达的影响,试验构建了 Hps感染3D4/21猪肺泡巨噬细胞模型,利用不同浓度的Hps(MOI分别为10∶1和100∶1)分别感染细胞0,6,12,24 h,收集各时间点细胞样品的总RNA和总蛋白,通过实时荧光定量PCR方法检测炎性因子及m6A修饰关键基因表达水平的变化情况.结果表明:当MOI为10∶1和100∶1时,TNF-α和IL-8基因总体呈上调表达,在Hps刺激3D4/21猪肺泡巨噬细胞24小时时均达到显著水平(P<0.05);在12小时时,除MOI为100∶1时的TNF-α基因外均达到显著水平(P<0.05),即Hps感染3D4/21猪肺泡巨噬细胞模型构建成功.在Hps刺激3D4/21猪肺泡巨噬细胞后m6A修饰关键基因METTL3、METTL14、WTAP、YTHDF2和FTO基因均呈下调表达,当MOI为10∶1时,在刺激6,12,24小时时METTL3、WTAP、YTHDF2基因达到显著水平(P<0.05),在刺激12,24小时时METTL14基因达到显著水平(P<0.05),FTO基因在刺激6,24小时时达到显著水平(P<0.05);当MOI为100∶1时,在刺激6,12,24小时时METTL3、METTL14、WTAP、YTHDF2和FTO基因均达到显著水平(P<0.05).说明Hps刺激3D4/21猪肺泡巨噬细胞系能够抑制m6A甲基化修饰相关基因的表达,并可能在m6A甲基化修饰过程中起到调控作用.