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变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)S和N融合双基因质粒的构建及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 王隆柏 1 ; 王晨燕 1 ; 吴学敏 1 ; 陈秋勇 1 ; 车勇良 1 ; 周伦江 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心

关键词： 猪流行性腹泻病毒(PEDV);S基因;N基因;M2-S-N融合双基因

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2018 年 38 卷 12 期

页码： 2241-2246

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为构建变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的S和N融合双基因质粒并表达出相应的蛋白,通过扩增变异PEDV的S和N基因,将S基因连接到pEAS-Blunt M2(M2)真核表达载体,构建M2-S质粒,通过同源重组原理,采用无缝拼接试剂盒将N基因克隆至M2-S基因片段,再转化到Trans1-T1感受态细胞中,构建M2-S-N融合双基因质粒。将M2-S-N融合双基因质粒转染到293T细胞,可表达出相应的S-N融合双基因蛋白。利用RT-PCR、Western blot技术和免疫BLAB/c鼠试验鉴定载体及蛋白表达的免疫活性,结果成功构建了M2-S-N融合双基因质粒,并表达出具有免疫原性的S-N融合双基因蛋白,且该蛋白能够诱导小鼠产生特异性抗体。变异PEDV的S和N基因融合双基因质粒的构建,为进一步开展变异PEDV的诊断技术及基因工程疫苗等研究奠定良好基础。

  • 相关文献

[1]变异猪流行性腹泻病毒M和N双基因融合真核表达及其活性鉴定. 王隆柏,陈秋勇,吴学敏,陈如敬,车勇良,周伦江. 2020

[2]猪流行性腹泻病毒S、N和ORF3基因的遗传变异分析. 王隆柏,林裕胜,车勇良,吴学敏,陈如敬,邵良平,周伦江. 2014

[3]福建省PEDV流行病学调查与S基因变异分析. 王隆柏,王晨燕. 2015

[4]番鸭呼肠孤病毒分子流行病学研究. 林锋强,朱小丽,陈少莺,王劭,陈仕龙,程晓霞,江斌,李兆龙. 2012

[5]福建省猪流行性腹泻病毒检测与S基因遗传变异分析. 王隆柏,吴晓鸣,王晨燕,车勇良,吴学敏,陈如敬,周伦江. 2015

[6]猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)福建分离株核衣壳蛋白基因(N)的克隆与表达分析. 王劭,朱小丽,朱晓琳,陈少莺,林锋强,陈仕龙,程晓霞,李兆龙,江斌. 2013

[7]猪流行性腹泻病毒P55野生毒株主要结构蛋白遗传分析. 高杏丹,陈曦,杨金先,俞伏松,李英英,林天龙,宋铁英. 2013

[8]变异猪流行性腹泻病毒M和N融合双基因的原核表达及表达产物免疫原性分析. 王隆柏,王晨燕,吴学敏,陈秋勇,车勇良,陈如敬,周伦江. 2018

[9]猪传染性胃肠炎病毒福建株的分离鉴定. 俞伏松,王劭,陈仕龙,程晓霞,黄梅清,江斌,陈少莺,邵良平. 2012

[10]猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)福建分离株核衣壳蛋白基因(加的克隆与表达分析. 王劭,朱小丽,朱晓琳,陈少莺,林锋强,陈仕龙,程晓霞,李兆龙,江斌. 2013

[11]猪传染性胃肠炎病毒核衣壳蛋白的原核表达及鉴定. 王劭,朱晓琳,陈少莺,林锋强,陈仕龙,程晓霞. 2012

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