文献类型： 中文期刊

作者： 刘志刚 ¹ ; 可小丽 ¹ ; 卢迈新 ¹ ; 方伟 ² ; 王淼 ¹ ; 朱华平 ¹ ; 高风英 ¹ ; 曹建萌 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所

2.广东省水生动物疫病预防控制中心

关键词： 尼罗罗非鱼;无乳链球菌;基因组表达文库

期刊名称： 南方水产科学

ISSN： 2095-0780

年卷期： 2015 年 11 卷 06 期

页码： 34-40

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了筛选罗非鱼(Oreochromis niloticus)无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)在鱼体内特异诱导表达基因,该研究构建了罗非鱼无乳链球菌强毒株Hod-1的基因组表达文库。采用Sau3AⅠ对无乳链球菌菌株Hod-1基因组DNA进行不完全酶切,回收大小为0.5~2.0 kb的DNA片段,并与经Bam HⅠ单酶切且去磷酸化的p ET-28 a/b/c表达载体连接,转化表达宿主菌BL21(DE3)。结果显示,所构建的无乳链球菌菌株Hod-1基因组表达文库含1.024×10~5个克隆,远大于覆盖无乳链球菌全基因组所需的最小库容量(45 579个)。PCR检测结果显示重组子中外源片段的插入率为94%,插入片段大小为0.5~2.0 kb,且分布均匀,测序结果显示插入序列与Gen Bank中无乳链球菌基因组序列同源性高达99%以上。结果表明该研究成功构建了罗非鱼无乳链球菌的基因组表达文库,该文库可用于无乳链球菌在罗非鱼体内诱导表达基因的筛选。