文献类型： 中文期刊

作者： 白昀 ¹ ; 王海燕 ¹ ; 王占伟 ¹ ; 纪燕 ² ; 吴叙苏 ¹ ; 刘冬霞 ¹ ; 邵国青 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心

2.南京农业大学

关键词： 岗地弓形虫;MIC3蛋白;单克隆抗体;胶体金

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2013 年 44 卷 10 期

页码： 1622-1628

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得针对猪弓形虫MIC3蛋白的单克隆抗体,为进一步研制免疫金标试纸条提供材料,作者以纯化的重组MIC3蛋白免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备单克隆抗体(McAb)。经ELISA筛选阳性克隆和亚克隆建株,体内诱生腹水法制备McAb,测定其亚类、效价,进行Western blot分析,并利用胶体金颗粒标记的McAb制备免疫金标试纸条。成功制备了2株稳定分泌抗MIC3蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株B7和D3,2株McAb的免疫球蛋白亚类均为IgG2a,其ELISA腹水效价分别为1∶64万和1∶192万,Western blot结果表明,2株McAbs腹水均能分别与纯化的重组MIC3蛋白和猪弓形虫全虫蛋白中大小为56和38ku左右的蛋白发生特异性反应;用纯化后McAb标记的胶体金颗粒制备的免疫金标试纸条可以检测到最低浓度为4×104 CFU·mL-1的弓形虫速殖子。本研究为猪弓形虫病的现场诊断提供了有效的方法,显示出很好的临床应用前景。