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类志贺毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)基因表达及间接ELISA方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 王警 1 ; 张雪寒 1 ; 郭芸芸 1 ; 张碧成 1 ; 吴庆侠 1 ; 何孔旺 1 ;

作者机构： 1.西藏农牧学院动物科学学院;江苏省农业科学院兽医研究所

关键词： 猪水肿病;产类志贺毒素大肠杆菌;SLT-Ⅱe;ELISA

期刊名称： 畜牧兽医科学(电子版)

ISSN： 2096-3637

年卷期： 2019 年 08 期

页码： 5-6

摘要： 试验针对产类志贺毒素大肠杆菌SLT-Ⅱe初步建立一种猪水肿病大肠杆菌的血清学检测方法。通过原核表达构建出重组菌pET28a-sumo-SLT-IIe/BL21在IPTG诱导下获得表达,表达产物以包涵体形式产生,使用十二烷基肌氨酸钠(SKL)变性的生化提纯步骤获取有生物学活性的重组蛋白。将提取的SLT-IIe蛋白作为抗原包被ELISA板,初步建立了特异性强的猪水肿病诊断方法,方阵滴定确定抗原最佳包被浓度为2μg/孔,最佳血清稀释浓度是1:25,HRP-羊抗猪二抗的工作浓度1:15 000,5%脱脂奶封闭1h,显色15 min。该方法的建立对猪水肿病流行病学调查以及预防和控制该病的发生有重要意义。

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