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绵羊肺炎支原体SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 林裕胜 1 ; 江锦秀 1 ; 张靖鹏 1 ; 游伟 1 ; 胡奇林 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 绵羊肺炎支原体;SYBR Green Ⅰ;荧光定量PCR

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2018 年 10 期

页码： 1054-1058

收录情况： 北大核心

摘要： 根据GenBank公布的绵羊肺炎支原体Y-98株(No.KM435069.1)P80基因序列,利用Beacon Designer7.9软件设计1对特异性引物,建立了绵羊肺炎支原体的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量检测方法。结果显示,该方法可以特异性检测绵羊肺炎支原体,对其他羊常见病原扩增结果无特异性扩增;该方法最低检测限为10copies·μL~(-1),组内和组间变异系数均小于2%;采用该方法对96份临床样品进行检测,绵羊肺炎支原体的阳性率为67.7%(65/96),结果显示该方法与TaqMan实时荧光定量PCR方法检测结果一致。以上结果表明本研究建立的绵羊肺炎支原体SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于绵羊肺炎支原体的病原学检测和流行病学调查。

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