文献类型： 中文期刊

作者： 艾秀莲 ¹ ; 陈新国 ¹ ; 季青 ¹ ; 龙涛 ¹ ; 余红 ¹ ; 昔奋攻 ¹ ; 董平 ¹ ; 石玉瑚 ¹ ;

作者机构： 1.新疆农业科学院微生物研究所

关键词： cDNA合成;PCR扩增;bFSH基因表达

期刊名称： 中国科学(B辑 化学 生命科学 地学)

ISSN： 1006-9240

年卷期： 1995 年 06 期

页码： 46-51

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从牛脑垂体中分离出mRNA,经反转录酶合成cDNA.利用PCR基因扩增技术,从cDNA中成功地扩增了牛促卵泡激素(bFSH)的β-亚基DNA.经序列分析证明所编码的氨基酸序列与天然bFSH的氨基酸序列相同.采用PCR扩增突变技术,去除真核信号肽,插入PGEX-2T表达载体,得到40 ku高效表达的融合蛋白,表达量占湿菌体的20％以上.用超声波破碎提取重组bFSH融合蛋白,凝血酶切除GST,得到14ku bFSH纯品,Western Blot检测呈阳性结果.用小鼠和幼兔做生物学活性检测,有一定的活性.