文献类型： 中文期刊

作者： 俞正玉 ¹ ; 徐向伟 ¹ ; 孙冰 ¹ ; 何孔旺 ¹ ; 郭容利 ¹ ; 杜露平 ¹ ; 温立斌 ¹ ; 张雪寒 ¹ ; 茅爱华 ¹ ; 倪艳秀 ¹ ; 李彬 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室

关键词： 猪传染性胃肠炎病毒;TaqMan荧光定量PCR;检测

期刊名称： Agricultural Science & Technology

ISSN： 1009-4229

年卷期： 2014 年 09 期

页码： 61-64

摘要： [目的]建立检测猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的TaqMan荧光定量PCR方法。[方法]根据TGEV基因组中保守的N基因序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有N基因的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应。[结果]该试验建立的荧光定量PCR方法在102~1010拷贝/μl之间具有良好的线性关系,相关系数达到0.99以上,扩增效率在90%~110%之间。该方法的检测灵敏度为10拷贝,敏感性较高,而且特异性较好,与猪的其他病毒核酸均无交叉反应;批内和批间的变异系数低于3%,表明该方法的重复性较好。应用该方法可以对疫苗的免疫效力进行定量检测和评价,也可以对临床病料进行检测。[结论]该研究建立的荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性好,可为TGEV的流行病学调查、疫苗开发和发病机制等研究提供可靠的工具。