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牛IL-2cDNA缺失突变的矫正及表达产物生物学活性测定

文献类型： 中文期刊

作者： 李春华 1 ; 李祥瑞 1 ; 魏晓锋 1 ; 徐立新 1 ; 李震 2 ; 陈芳 3 ;

作者机构： 1.南京农业大学动物医学院

2.上海市农业科学院畜牧兽医研究所

3.南京师范大学生命科学院

关键词： 牛白细胞介素2(IL-2)基因;重叠延伸剪接术;定点突变;表达

期刊名称： 南京农业大学学报

ISSN： 1000-2030

年卷期： 2003 年 26 卷 04 期

页码： 89-92

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank中的牛IL 2基因序列 ,设计一对引物Pa和Pd ,以牛外周血淋巴细胞为材料 ,用RT PCR方法扩增得到牛IL 2cDNA ,测序发现在扩增产物的第 2 4 0位缺失了一个A碱基。采用重叠延伸剪接术 (SOE法 )向突变体定点插入该碱基 ,然后与表达载体连接 ,获得了正确的表达产物。经RT PCR检测证明 ,重组的牛IL 2蛋白具有较好的生物学活性 ,能诱导肿瘤坏死因子TNF α和干扰素IFN γ的产生。

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