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羊流产衣原体主要外膜蛋白基因的克隆与序列分析

文献类型: 中文期刊

作者: 苗振川 1 ; 哈斯阿古拉 2 ; 赵亚芳 1 ; 张宝发 1 ; 张鹤龄 2 ;

作者机构: 1.内蒙古畜牧科学院

2.内蒙古大学生物工程中心

关键词: 羊流产衣原体;主要外膜蛋白基因;克隆;序列分析

期刊名称: 畜牧兽医学报

ISSN: 0366-6964

年卷期: 2001 年 32 卷 01 期

页码: 86-91

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 将自行分离、传代培养的内蒙古地区山羊流产衣原体按常规方法分离纯化 ,提取衣原体基因组DNA作为模板 ,按照国外发表的衣原体主要外膜蛋白 (MOMP)基因两端序列设计合成一对引物 ,用PCR方法扩增出一 1 17Kb的DNA片段。利用引物上预先设计的限制性内切酶位点 ,将扩增片段经限制性内切酶切割后连接到 pUC19质粒相应位点上 ,转化大肠杆菌DH5α ,筛选重组子。经PCR检测和内切酶分析鉴定含MOMP基因的重组子质粒。对克隆片段进行全序列分析 ,结果证明得到MOMP全编码序列的基因克隆。本株衣原体MOMP编码区由 1170个核苷酸组成。序列比较发现本株衣原体的MOMP基因与国外的羊流产衣原体S2 6/3株的MOMP基因完全相同 ,与B577株的MOMP基因仅有一个核苷酸的同义变异。

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