文献类型： 中文期刊

作者： 何延华 ¹ ; 王新华 ¹ ; 薄新文 ¹ ; 陈南颖 ¹ ; 张平 ¹ ; 张兴亚 ¹ ; 韩猛立 ¹ ; 黄新 ¹ ; 康立超 ¹ ;

作者机构： 1.新疆农垦科学院新疆兵团绵羊繁育重点实验室

关键词： 捻转血矛线虫;Hc38基因;RNA干扰;发育

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2013 年 22 卷 01 期

页码： 19-26

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过研究Hc38基因对捻转血矛线虫L3期幼虫发育的影响,探索Hc38基因功能,为利用该基因防治捻转血矛线虫的进一步研究提供依据。针对Hc38基因序列设计并合成特异性dsRNA和siRNA,采用浸泡的方法对捻转血矛线虫L3期幼虫进行RNA干扰(RNAi)试验,利用实时荧光定量PCR分析Hc38基因在L3期幼虫中的转录抑制效果,同时将dsRNA和siRNA浸泡24h后的L3期幼虫感染绵羊,研究Hc38基因的沉默对捻转血矛线虫L3期幼虫在绵羊体内发育的影响,定期采集绵羊粪便检查虫卵数,30d后剖检绵羊皱胃,检查荷虫数的变化。实时荧光定量PCR检测表明,各试验组Hc38基因的相对含量显著低于对照组(P<0.01),浸泡72h后,Hc38-dsRNA组和Hc38-siRNA组Hc38基因的表达量分别仅为对照组的32.27%和14.93%。绵羊体内干扰沉默效果显示,试验组Hc38干扰组虫卵减少率最高,为50%,减虫率最高,为48.6%。通过浸泡法导入的dsRNA和siRNA均能有效抑制Hc38基因的转录,同时Hc38基因的沉默与幼虫的发育密切相关,为捻转血矛线虫及其他寄生线虫的基因功能研究提供一种新的方法。