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猪细环病毒k2型SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 陈如敬 1 ; 黄秋宇 2 ; 修金生 3 ; 吴学敏 1 ; 严山 1 ; 车勇良 1 ; 周伦江 1 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心

2.福建省龙岩市农业学校

3.福建农林大学动物科学学院

关键词: 猪细环病毒k2型;ORF2基因;SYBR Green Ⅰ;实时荧光定量PCR方法

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2016 年 05 期

页码: 10-15

收录情况: 北大核心

摘要: 为建立检测猪细环病毒k2型(Porcine Torque teno sus virus k2,PTTSu Vk2)SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,本研究根据PTTSu Vk2 ORF2基因序列特征设计引物,建立基于SYBR GreenⅠ检测PTTSu Vk2的实时荧光定量PCR方法,该方法在PTTSu Vk2 ORF2基因含量为1.92×102~1.92×107 copies/μL反应范围内有很好的线性关系。扩增产物溶解曲线分析仅出现单一特异峰,无引物二聚体,Tm值为(83.83±0.08)℃,对猪圆环病毒(Porcine circovirus type 1 and type 2,PCV1和PCV2)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)、猪博卡病毒5型(Porcine bovavirus type 5,Pbo V5)、猪细环病毒1a型(PTTSu V 1a)和1b型(PTTSu V 1b)核酸均无阳性信号扩增,可重复性好,组内变异系数为0.39%~1.69%,组间变异系数0.69%~2.19%。本方法的建立可用于定量分析PTTSu Vk2感染噬性组织器官和感染程度,为PTTSu Vk2的流行病学研究及临床诊断等提供了一种可靠的方法。

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