文献类型: 中文期刊
作者: 陈如敬 1 ; 吴学敏 1 ; 车勇良 1 ; 王隆柏 1 ; 刘玉涛 1 ; 严山 1 ; 魏宏 1 ; 庄向生 1 ; 周伦江 1 ;
作者机构: 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒;重组GP5表位蛋白;间接ELISA
期刊名称: 中国畜牧兽医
ISSN: 1671-7236
年卷期: 2014 年 41 卷 04 期
页码: 43-47
收录情况: 北大核心
摘要: 利用猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5抗原表位串联表达重组蛋白作为包被抗原,建立检测PPRSV抗体的间接ELISA方法。重组蛋白最佳包被浓度为7.5μg/mL,最佳封闭液为5%脱脂奶粉,37℃封闭2h;血清最适稀释度为1∶100,37℃作用2h;兔抗猪IgG/辣根酶(HRP)(1∶3000),37℃作用2h;37℃避光显色15min读取D450nm值。结果经统计学分析得出,S/P值≥0.254为阳性,S/P值≤0.212为阴性。所建立的ELISA方法检测其他5种猪常见病原阳性血清,其D450nm值均小于0.212。利用建立的ELISA方法对临床免疫勃林格殷格翰猪繁殖与呼吸综合征活疫苗4周后的猪血清70份进行检测,其D450nm值均大于0.85,表明本研究建立的重组GP5表位蛋白间接ELISA方法可用于临床样品的监测。
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