文献类型： 中文期刊
作者： 徐悦 1 ; 梁利群 2 ; 孙博 2 ; 常玉梅 2 ;
作者机构： 1.上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心
2.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
关键词： 瓦氏雅罗鱼;鳃细胞;原代培养;耐碱;渗透压胁迫响应机制
期刊名称： 上海海洋大学学报
ISSN： 1674-5566
年卷期： 2023 年 002 期
页码： 283-291
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为探究碱水环境中自然优势种瓦氏雅罗鱼（Leuciscus waleckii）的耐碱离子调节机制，采用胰蛋白酶消化法对其鳃细胞（Gill cells of Leuciscus waleckii, LWG）进行体外培养，确定该类原代和传代细胞培养的适宜条件并进行耐受实验，用以对瓦氏雅罗鱼在碱生境中的生长特性进行论证。结果表明：瓦氏雅罗鱼原代鳃细胞培养在15℃、含有10%胎牛血清（Fetal bovine serum, FBS）的DMEM培养基（Dulbecco’s modified eagle medium）中可获得稳定、良好的培养效果；36～72 h即可传代，稳定传代后的细胞命名为LWG细胞。传代培养过程中，36 h时LWG细胞生长代谢旺盛可用于后续实验。碱水生境中，为缓解碱离子对鱼体造成的损伤，鳃细胞将启动渗透压胁迫应答机制。对LWG细胞进行碱胁迫实验并检测其细胞活性和功能后发现：LWG细胞在25～50 mmol/L NaHCO3浓度下耐受3 h时，增殖率约60%并初现细胞凋亡。由此推断，在25～50 mmol/L的碳酸盐碱度胁迫下，LWG细胞具有强渗透压的碱度耐受性并促使细胞发生凋亡现象。对LWG细胞原代培养条件的摸索，为探索瓦氏雅罗鱼碱胁迫下渗透压应激响应机制和相关基因功能的验证提供相对稳定的实验材料。
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