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猪内源性逆转录病毒检测的三重PCR方法的建立及其在五指山猪组织样品检测中的初步应用

文献类型: 中文期刊

作者: 瑞雪 1 ; 张云航 2 ; 李杨 2 ; 谭晨 2 ; 蔡艺菲 2 ; 刘园园 1 ; 曹宗喜 1 ; 张艳 1 ; 孙瑞萍 1 ; 刘光亮 1 ;

作者机构: 1.海南省农业科学院畜牧兽医研究所海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室

2.新疆农业大学动物医学学院

关键词: 猪内源性逆转录病毒;囊膜基因;三重PCR检测方法;组织样品

期刊名称: 畜牧兽医学报

ISSN: 0366-6964

年卷期: 2025 年 56 卷 007 期

页码: 3548-3554

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本研究旨在建立可同时检测猪基因组中的猪内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)并鉴别PERV-A、PERV-B、PERV-C三种亚型PERV的三重PCR检测方法.根据PERV不同亚型囊膜(env)基因设计特异性引物,经反应条件和反应体系优化后对该方法进行特异性、敏感性及重复性试验验证.结果表明:本研究建立的三重PCR检测方法特异性强,可特异性扩增三种亚型PERV目的基因,对猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒扩增结果呈阴性;该方法的敏感性较好,对PERV-A、PERV-B、PERV-C质粒标准品的检测下限分别为1×102、1×103和1×102拷贝·μL-1;采用建立的三重PCR方法检测103份组织样品,其中PERV-A的阳性率为100%(103/103),PERV-B的阳性率为100%(103/103),PER V-C的阳性率为54%(56/103),与经典单重PCR方法进行比较,符合率分别为100%、100%、96.6%.本研究成功建立了一种特异性强、敏感性较好、快速简便的三重PCR方法,可用于PERV三种亚型同时检测的鉴别诊断,为筛选无PERV的猪源供体器官提供技术支撑.

  • 相关文献

[1]猪内源性逆转录病毒三重实时荧光定量PCR检测方法的建立. 瑞雪,张云航,李杨,谭晨,蔡艺菲,刘园园,曹宗喜,张艳,孙瑞萍,刘光亮. 2025

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