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高活力5′-磷酸二酯酶制备及水解RNA的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 张一平 1 ; 华洵璐 2 ; 李靖 2 ; 谢骏 2 ; 何义进 2 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室

2.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室;江苏省苏微微生物研究有限公司

关键词： 麦芽根;5′-磷酸二酯酶;核苷酸;超滤;盐析

期刊名称： 生物技术

ISSN： 1004-311X

年卷期： 2010 年 20 卷 01 期

页码： 62-65

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:获得高活力5′-磷酸二酯酶液,提高核酸RNA酶解效率。方法:采用超滤和盐析技术对从麦芽根浸提液中纯化5′-磷酸二酯酶工艺进行研究,采用单因子试验法优化酶解工艺条件。结果:浸提液依次经过5万Da超滤膜浓缩、40%饱和度硫酸铵盐析、5万Da超滤膜脱盐后,酶活力可达1 500U/ml;第1次超滤膜透过液可作为浸提液循环使用,酶活力是水浸提的1.15倍;第2次超滤膜透过液浓缩5倍后,可回收56.46%硫酸铵,浓缩母液可按1∶2比例循环使用;在底物浓度5.8%、酶用量8%、反应时间2h条件下,RNA酶解率可达95%。结论:初步建立了适合工业化规模的核苷酸生产新工艺。

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