文献类型： 中文期刊

作者： 陈桂花 ¹ ; 贺文斌 ² ; 徐黎明 ² ; 赵景壮 ² ; 任广明 ² ; 邵轶智 ² ; 段凯越 ¹ ; 卢彤岩 ² ;

作者机构： 1.上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心

2.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所

关键词： 传染性胰脏坏死病毒;蛋白表达;VP3蛋白;免疫原性

期刊名称： 大连海洋大学学报

ISSN：

年卷期： 2021 年 004 期

页码： 573-579

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为丰富传染性胰脏坏死病毒（infectious pancreas necrosis virus, IPNV）的检测方法,以GenogroupⅠ型的IPNV ChRtm213分离株基因组RNA为模板,利用一步法RT-PCR扩增获得了编码IPNV VP3基因序列（711 bp）,将其克隆至pET-32a原核表达载体,利用大肠杆菌Rosetta进行VP3蛋白表达,以纯化的VP3蛋白为免疫原制备鼠抗血清,利用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）对抗血清效价进行测定,并利用间接免疫荧光抗体法（indirect immunofluorescent antibody test, IFAT）和中国不同地区的IPNV分离株,对抗血清识别中国现行IPNV分离株的能力进行免疫学鉴定。结果表明:SDS-PAGE分析显示,表达纯化的VP3蛋白条带单一,相对分子质量约为45 000,与理论值相符;抗血清效价分析显示,所制备的鼠抗IPNV VP3血清与IPNV的反应效价为16 000,与纯化的IPNV VP3蛋白的反应效价为32 000;间接免疫荧光抗体法分析显示,制备的鼠抗血清能够特异性识别中国不同地区的GenogroupⅠ和GenogroupⅤIPNV分离株,且该血清不与传染性造血器官坏死病毒（IHNV）和病毒性出血性败血症病毒（VHSV）发生交叉反应,具备较好的特异性。研究表明,本研究中利用原核表达系统表达的IPNV VP3蛋白具有良好的免疫原性,所制备的IPNV VP3抗血清能够特异性识别中国不同地区的IPNV分离株。