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鸭瘟病毒转移质粒的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 张馨月 1 ; 冉多良 2 ; 叶伟成 1 ; 袁秀芳 1 ; 王一成 1 ; 刘蔓雯 1 ; 张存 1 ;

作者机构: 1.浙江省农科院畜牧兽医研究所

2.新疆农业大学动物医学学院

关键词: 鸭瘟病毒;TK基因;转移载体

期刊名称: 动物医学进展

ISSN: 1007-5038

年卷期: 2010 年 31 卷 03 期

页码: 25-29

收录情况: 北大核心

摘要: 为了建立重组鸭瘟病毒技术,构建了鸭瘟病毒转移质粒。在对鸭瘟强毒和弱毒株TK基因进行测序分析后,将鸭瘟病毒TK-UL24DNA片段克隆于pUC18载体中,构建了质粒pTK;将PCR扩增的GFP真核表达盒插入pTK质粒的TK基因内部,获得转移载体质粒pTK-GFP。鸭瘟病毒TK-UL24测序分析表明鸭瘟强、弱毒株TK基因序列完全相同;转移载体携带Pcmv-GFP-SV40pA表达盒,测序验证其序列与源序列一致。pTK-GFP在脂质体介导下,转染鸭胚成纤维细胞和鸭肾细胞,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况。质粒转染细胞后,绿色荧光蛋白得到了有效的表达,为进一步开展重组鸭瘟病毒的研究和构建具有遗传标记的鸭瘟疫苗奠定了基础。

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[1]鸭瘟病毒强弱毒株TK基因的克隆及序列比较分析. 张馨月,张存,冉多良. 2007

[2]鸭瘟病毒新近分离毒株部分基因变异分析. 傅光华,陈翠腾,刘荣昌,卢立志,施少华,江斌,傅秋玲,程龙飞,沈军达,田勇,万春和,陈红梅,黄瑜. 2018

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