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茶树茉莉酸羧基甲基转移酶基因(CsJMT1)的克隆与表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 曹克梅 1 ; 杨春 2 ; 郭燕 2 ; 陈娟 2 ; 李燕 2 ; 梁思慧 2 ; 林开勤 2 ; 乔大河 2 ; 陈正武 2 ;

作者机构: 1.贵州大学茶学院

2.贵州省农业科学院茶叶研究所贵州省茶种质创新工程技术研究中心

关键词: 茶树;茉莉酸羧基甲基转移酶;亚细胞定位;原核表达;茶尺蠖

期刊名称: 分子植物育种

ISSN: 1672-416X

年卷期: 2021 年 008 期

页码: 2437-2449

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 茉莉酸羧基甲基转移酶(jasmonic acid carboxyl methyltransferase, JMT)在茉莉酸类介导的植物生长发育以及防御调控中发挥着重要作用。本研究以茶树品种‘黔茶1号’为材料,利用RT-PCR方法克隆了一个JMT基因并将其命名为CsJMT1。该基因编码区全长1 077 bp,编码358个氨基酸,含有一个Methyltransf7功能结构域,属于SABATH家族成员。进化树分析显示其与柑橘和雷公藤的JMT序列亲缘关系最近,序列相似性分别为73.7%和72.7%。以CsJMT1的全长开放阅读框(ORF)序列构建GFP融合蛋白表达载体,基于拟南芥原生质体的亚细胞定位分析显示其定位在细胞质。原核表达和蛋白纯化显示在破碎的细胞上清中可以检测到目的蛋白的表达。对外源JA、SA和Me SA处理以及茶尺蠖取食后‘黔茶1号’叶片中CsJMT1的表达进行荧光定量PCR分析,结果显示外源JA、SA处理后其表达均显著下调,但在JA处理后48 h其表达量又明显上调;而MeSA处理后2 h CsJMT1的表达量达到峰值,随后又显著下调,在处理后24 h又恢复到处理前水平;茶尺蠖取食则能够显著诱导其表达。对3个品种的茶叶鲜叶摊放(萎凋)处理不同时间后检测CsJMT1的表达情况则显示摊放(萎凋)处理诱导了其表达,但不同品种的诱导程度存在差异。本研究结果初步明确了CsJMT1能够参与茶树防御响应以及香气形成调控。

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