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利用杆状病毒Bac-to-Bac系统在家蚕表达猪繁殖与呼吸综合征病毒的E蛋白和M蛋白

文献类型: 中文期刊

作者: 王丹 1 ; BHASKAR Roy 1 ; 李兴华 1 ; 杨华军 1 ; 周芳 1 ; 缪云根 1 ; 云涛 2 ; 刘光清 2 ;

作者机构: 1.浙江大学动物科学学院

2.浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所

关键词: 家蚕;Bac-to-Bac表达系统;猪繁殖与呼吸综合征病毒;E蛋白;M蛋白

期刊名称: 蚕业科学

ISSN: 0257-4799

年卷期: 2010 年 36 卷 05 期

页码: 132-136

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种严重危害养猪业的传染性病原。PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白基因是开发PRRSV病毒新型疫苗的目标基因。利用杆状病毒Bac-to-Bac表达系统,将PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白的基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb中,获得重组转移质粒pFastBacHTb-E和pFastBacHTb-M,转化大肠杆菌Bm DH10 Bac感受态细胞,获得重组杆粒BmNPV Bacmid-E、BmNPV Bacmid-M,将这些重组杆粒转染家蚕培养细胞Bm5,获得重组病毒BmNPV-E和BmNPV-M。将2种重组病毒分别接种5龄起蚕,用SDS-PAGE和Western blotting方法在重组Bacmid DNA转染的Bm5细胞和感染重组病毒的家蚕幼虫血细胞中分别检测到分子质量约20 kD和18 kD的E蛋白和M蛋白,表明PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白在家蚕培养细胞及幼虫体内获得了表达,为利用家蚕-杆状病毒表达系统研制PRRSV的新型疫苗与诊断试剂奠定了基础。

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