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基于免扩增高通量测序的转基因定量检测方法研究

文献类型： 中文期刊

作者： 李凯 1 ; 付军 2 ; 陈锐 3 ; 陈笑芸 4 ; 李亮 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所

2.迈克生物股份有限公司

3.天津市农业科学院种质资源与生物技术研究所

4.浙江省农业科学院农产品质量安全与营养研究所

关键词： 质粒DNA;标准物质;测序技术;dPCR

期刊名称： 生物技术进展

ISSN： 2095-2341

年卷期： 2024 年 004 期

页码： 610-617

摘要： 转基因定量检测在食品安全监管和消费者知情权保障中扮演着重要角色。当前，数字PCR方法被广泛认可为核酸精准定量的黄金标准，但缺乏与之相互验证的新型核酸定量技术，这在一定程度上限制了其应用。然而，近年来高通量测序技术的兴起为解决这一难题提供了新的可能性。尽管高通量测序技术主要用于核酸定性序列测定，但其在核酸定量领域的应用潜力尚未充分挖掘。以含有转基因T-NOS、P-35S、CP4-EPSPS和大豆内标准基因Lectin的质粒DNA标准物质为检测对象，采用免扩增建库的方法，比较了NGS、三代测序以及数字PCR定值的差异。结果表明，NGS测序结果与数字PCR结果存在显著性差异，这一发现突显了目前核酸定量技术中的挑战和需求。然而，值得注意的是，三代测序结果与数字PCR检测结果一致性良好，显示了其作为转基因核酸精准定量方法的潜力。这一发现为未来转基因产品标识阈值的制定提供了技术上的支撑和参考，为食品安全监管提供了新的技术途径。

  • 相关文献

[1]转基因检测技术与标准物质研究概述. 陈锐,朱珠,兰青阔,赵新,王永. 2014

[2]转基因检测数据库概述. 李夏莹,王颢潜,李文龙,孙双艳,王永,兰青阔,张秀杰. 2021

[3]羊源性基因组DNA标准物质研制. 纪艺,王凯莉,余卉茹,赵新,丁霖,彭城,徐俊锋,陈笑芸. 2024

[4]基于PCR技术的DNA分析测试关键要素. 安娜,柳方方,董美,胡晓颖,宛煜嵩,金芜军,兰青阔,李亮,韩阳. 2019

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