文献类型： 中文期刊
作者： 任耀军 1 ; 薄新文 1 ; 王新华 1 ;
作者机构： 1.新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室
关键词： SMAP-29;毕赤酵母;真核表达;酵母菌落PCR
期刊名称： 石河子大学学报(自然科学版)
ISSN： 1007-7383
年卷期： 2008 年 26 卷 06 期
页码： 41-45
摘要： 依据毕赤酵母密码子偏好性,设计合成抗菌肽SMAP-29成熟肽基因片段,克隆到表达载体pPIC3.5K上,SalI线性化后转化毕赤酵母GS115,418抗性筛选高拷贝克隆,再由酵母菌落PCR鉴定;阳性克隆用甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE分析,结果在诱导第2d的酵母裂解液中检测到与预期的SMAP-29分子量接近,约3.2kD的诱导表达带;Trizol法提取酵母总RNA,并通过RT-PCR扩增SMAP-29mRNA,发现表达期的酵母细胞中存在SMAP-29mRNA,而对照没有检出,表明SMAP-29在毕赤酵母中存在表达。
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