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基于CRISPR/Cas9系统的拟南芥双链结合蛋白AtHyl1基因编辑

文献类型: 中文期刊

作者: 吴坤鑫 1 ; 张春微 1 ; 刘志昕 1 ; 余乃通 1 ; 王健华 1 ; 张秀春 1 ;

作者机构: 1.null

关键词: CRISPR/Cas9;基因编辑;AtHyl1;拟南芥三突变体hyl1dcl2drb4

期刊名称: 基因组学与应用生物学

ISSN: 1674-568X

年卷期: 2019 年 006 期

页码: 2672-2676

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: RNA沉默是植物重要的抗病毒防御机制,双链RNA结合蛋白(dsRNA-binding proteins, DRB)是RNA沉默信号途径中的关键蛋白.DRB1/HYL1是拟南芥基因组编码的7个DRBs之一,本研究将人工合成含2个AtHyl1靶位点序列的串联t RNA-gRNA片段导入CRISPR/Cas9表达载体中,构建双靶点的CRISPR/Cas9表达载体,通过转化拟南芥dcl2drb4双突变体获得36株转基因阳性植株.对经测序分析可能已发生基因编辑的3株进行单克隆测序分析,测序结果表明均已发生编辑,获得了AtHyl1基因被编辑的拟南芥dcl2drb4突变体T1代转基因植物.该结果为研究AtHyl1是否参与DCL4介导的抗病毒RNA沉默通路提供了帮助.

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