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仙人掌总RNA提取方法的改进与分析

文献类型： 中文期刊

作者： 周启林 1 ; 罗志文 2 ; 胡福初 2 ; 张治礼 2 ; 刘志昕 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室

2.海南省农业科学院热带果树研究所/海南省热带果树生物学重点实验室

关键词： 仙人掌;RNA提取;RT-PCR;灵敏度检测

期刊名称： 广东农业科学

ISSN： 1004-874X

年卷期： 2017 年 44 卷 03 期

页码： 75-79

摘要： 利用亚硫酸钠分别与TRIzol试剂、RNA plant plus Reagent试剂、BioTeke多糖多酚植物总RNA提取试剂、艾德莱EASY spin Plus植物RNA快速提取试剂和OMEGA Plant RNA试剂结合的方法,均可获得高质量的仙人掌茎总RNA。反转录成cDNA,RT-PCR结果显示,5种方法提取的总RNA反转录后均能特异性扩增到matK基因。使用TRIzol试剂盒、RNA plant plus Reagent试剂盒和艾德莱EASY spin Plus植物RNA快速提取试剂盒提取RNA质量相对较高,在cDNA以1∶100稀释时能检测到matK基因;而使用BioTeke多糖多酚植物总RNA提取试剂盒或OMEGA Plant RNA试剂盒时,灵敏度稍低,在cDNA以1∶10稀释时,能检测到目的基因。利用亚硫酸钠结合不同植物总RNA提取试剂盒进行比较研究,为后续制备仙人掌茎高质量cDNA文库及其分子生物学研究奠定基础。

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