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南极磷虾胰蛋白酶基因克隆、异源表达及其降解塑化剂研究

文献类型: 中文期刊

作者: 邹华英 1 ; 谭佳豪 1 ; 王芳 2 ; 宋佳 3 ; 陈梦瑶 1 ; 徐甲坤 2 ;

作者机构: 1.上海海洋大学食品学院

2.中国水产科学研究院黄海水产研究所

3.青岛科技大学生物工程学院

关键词: 南极磷虾;胰蛋白酶;异源表达;PAEs;降解;塑化剂

期刊名称: 中国水产科学

ISSN: 1005-8737

年卷期: 2025 年 32 卷 006 期

页码: 729-741

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本研究旨在从南极磷虾中筛选克隆获得胰白蛋酶基因(EsTRY),构建重组表达载体EsTRY-pCold-SUMO,在大肠杆菌中实现高效异源表达,研究该酶对邻苯二甲酸酯类化合物(PAEs)的降解活性.南极磷虾胰蛋白酶(EsTRY)的基因长1350 bp,编码449个氨基酸,理论分子量(MW)为47040.35 Da,理论等电点(pI)为4.90.结构分析表明,EsTRY含有典型的催化三联体(Asp/Glu-Ser-His)及一个底物特异性结合位点,属于丝氨酸蛋白酶家族.EsTRY的酯酶活性达到18973 U/mL,比酶活为5802.15 U/mg.最适反应温度为25 ℃,最适pH为7.0.酶催化降解实验表明,EsTRY 对 PAEs 有较强的降解能力,15 min 内分别降解 13.2%、34.4%、63.5%、48.9%的 1 mmol/L DMP、DEP、DPRP、DBP;5 h内降解率分别达到39.4%、62.7%、86.8%、98.7%.本研究发现EsTRY对PAEs具有降解活性,为塑化剂污染的生物治理提供了新的潜在工具,同时也为南极磷虾的高效利用与高值开发提供了科学依据.

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