文献类型： 中文期刊
作者： 车勇良 1 ; 陈如敬 1 ; 江斌 1 ; 王隆柏 1 ; 魏宏 1 ; 吴学敏 1 ; 庄向生 1 ; 周伦江 1 ;
作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词： 副猪嗜血杆菌;寡肽结合蛋白基因;克隆;表达;间接ELISA
期刊名称： 福建农林大学学报(自然科学版)
ISSN： 1671-5470
年卷期： 2015 年 44 卷 03 期
页码： 282-288
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 采用PCR方法扩增副猪嗜血杆菌(Hps)的寡肽结合蛋白(Opp A)基因,序列测定结果表明,扩增片段全长1654 bp.将扩增片段插入表达载体p GEX-6P-1中,转化BL21进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果表明,重组融合蛋白大小约为87 ku,以纯化的重组蛋白Opp A作为抗原,建立Hps抗体的间接ELISA检测方法.通过试验确定最佳的反应条件为:抗原包被浓度为1.0μg·孔-1,于37℃包被1 h,待检血清的稀释度为1∶50,阳性判断标准(D450 nm)大于0.643.特异性和重复性试验结果表明,建立的间接ELISA方法具有良好的特异性和稳定性,可用于Hps抗体的检测.
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