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猪圆环病毒2型GD株ORF2基因重组腺病毒的构建及其表达

文献类型: 中文期刊

作者: 宋长绪 1 ; 蒋智勇 1 ; 王贵平 1 ; 高向阳 2 ; 赵亚华 2 ;

作者机构: 1.广东省农业科学院兽医研究所

2.华南农业大学生命科学院

关键词: 猪圆环病毒2型;ORF2基因;重组腺病毒

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2005 年 27 卷 05 期

页码: 348-351

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据PCV2 ORF2基因的序列设计两条引物从PCV2的PK15细胞培养物中扩增出ORF2基因(702 bp)。将此基因片段克隆入pMD 18_T载体,经酶切、测序鉴定筛选出重组质粒pMD_ORF2。将PCV2 ORF2基因克隆入pAdeasy腺病毒载体系统的穿梭质粒pAdTrack_CMV中,获得重组穿梭质粒pAdTrack_CMV_ORF2,将重组质粒与腺病毒骨架载体共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒pAdCMV_ORF2,然后用PacⅠ线性化后转染293细胞,在293细胞内包装出重组腺病毒。通过荧光显微镜观察、PCR检测和Western blot检测证明PCV2 ORF2基因在293细胞内获得表达,ORF2多肽具有良好的免疫原性。

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