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大口黑鲈肌肉生长抑制素前肽真核表达载体的构建及其在肌肉组织中的表达

文献类型: 中文期刊

作者: 张宁宁 1 ; 白俊杰 2 ; 何小平 2 ; 郭玉函 2 ; 叶星 2 ; 李胜杰 2 ; 杜晓东 1 ;

作者机构: 1.广东海洋大学水产学院

2.中国水产科学研究院珠江水产研究所中国水产科学研究院热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室

关键词: 大口黑鲈;肌肉生长抑制素(MSTN);真核表达;表达载体;肌肉注射;免疫组织化学

期刊名称: 广东海洋大学学报

ISSN: 1673-9159

年卷期: 2009 年 29 卷 01 期

页码: 16-20

摘要: 将大口黑鲈(Micropterus salmoide)肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)前肽(MSTN-Pro)的cDNA定向克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)/mycHisB中,双酶切检测和测序鉴定证实,插入pcDNA3.1(-)/mycHisB载体中的片段为目的基因的核苷酸序列,MSTN基因前肽cDNA为正向插入,且重组质粒无错配或插入移位等突变。采用肌肉注射法将重组表达质粒注入大口黑鲈背部肌肉组织,在注射后第2天经RT-PCR检测到MSTN前肽基因mRNA的表达,第6天经免疫组化学检测到MSTN前肽蛋白的表达,第8天蛋白表达强度增强,对照组始终未检测到MSTN前肽基因的表达。

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