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绵羊生殖道抗菌肽cDNA克隆及真核表达载体构建

文献类型： 中文期刊

作者： 库朝锋 1 ; 王新华 2 ; 薄新文 2 ; 张慧 1 ; 吕廷德 1 ; 李娜 1 ;

作者机构： 1.石河子大学动物科技学院

2.新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室

关键词： 绵羊生殖道;抗菌肽;cDNA克隆;表达载体

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2009 年 36 卷 06 期

页码： 70-73

收录情况： 北大核心

摘要： 绵羊生殖道抗菌肽(ORTAP40)是从中国美利奴绵羊生殖道分离的一种新型的阳离子抗菌肽,在绵羊发育早期的防御中起到了主要的作用。在本研究中,根据ORTAP40 N端氨基酸序列设计引物,利用3′RACE技术克隆了绵羊生殖道抗菌肽3′末端全长cDNA序列,并被GenBank收录,登录号为FJ514476,经过cDNA序列分析显示,ORTAP40是一个4.8 ku的小肽,与先期分离纯化的分子质量一致。作者随后参照巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子偏好性,设计并人工合成了OR-TAP40成熟肽目的基因片段,所合成的ORTAP40基因全长120 bp,通过基因重组的方法将目的基因克隆到pPIC3.5K和pPICZαA表达载体上,成功构建了重组酵母胞内表达载体pPIC3.5K-ORTAP40和外泌表达载体pPICZαA-ORTAP40,为抗菌肽的开发和应用奠定了基础。

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