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应用多重PCR技术筛选检测转Bt基因作物

文献类型： 中文期刊

作者： 李飞武 1 ; 闫伟 2 ; 龙丽坤 3 ; 李葱葱 4 ; 张世宏;

作者机构： 1.吉林省农业科学院

2.吉林农业大学

3.吉林省农业科学院农业生物技术研究所

4.吉林省农业科学院生物技术研究中心

关键词： 转基因生物;多重PCR;简并PCR;Bt基因;筛选检测

期刊名称： 现代食品科技

ISSN： 1673-9078

年卷期： 2014 年 05 期

页码： 262-266+124

摘要： Bt基因在抗虫转基因作物中广泛应用,是转基因食品筛选检测中最主要的目的基因。本研究依据核苷酸序列分析结果,将在转基因作物中常见的8种Bt基因(cry1Ab、cry1Ac、cry1Ab/Ac、cry1A.105、cry1Ac-M、cry2Ab、cry3A和cry3Bb)划分为cry1A、cry2A、cry3A三个组,并根据每个组的一致性序列设计了可分别检测各组Bt基因的特异性检测引物,其中cry1A组采用了简并引物,经过特异性、灵敏度等测试,建立了针对cry1A组、cry2A组和cry3A组的单一PCR检测方法。此外,通过将这三对检测引物放入同一PCR体系中,还建立了可特异检测上述3组Bt基因的三重PCR方法。结果表明,本研究建立的单一PCR和三重PCR方法均可从各类样品中准确检测出预期Bt基因成分,检测灵敏度达到0.1%。本方法特异性强、灵敏度高,在转基因成分的筛选检测中有很好的应用前景。

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