文献类型： 中文期刊

作者： 戴文婷 ¹ ; 傅明骏 ¹ ; 赵超 ¹ ; 周发林 ¹ ; 杨其彬 ¹ ; 王艳 ¹ ; 史进选 ¹ ; 邱丽华 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院南海水产研究所

关键词： 斑节对虾;CDK2;实时荧光定量PCR;原核表达;卵巢发育

期刊名称： 南方水产科学

ISSN： 2095-0780

年卷期： 2015 年 11 卷 02 期

页码： 1-11

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 该研究以斑节对虾(Penaeus monodon)c DNA文库中的CDK2片段为基础,利用RACE技术获得Pm CDK2的c DNA全长,并利用生物信息学对其进行了分析。Pm CDK2基因全长1 679 bp,包括编码306个氨基酸的921 bp的开放阅读框(ORF),258 bp的5'UTR和500 bp的3'UTR。同源性分析显示,Pm CDK2与罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)等物种的CDK2具有较高的同源性。使用荧光定量PCR技术研究了Pm CDK2的mRNA在不同组织和卵巢发育各时期的相对表达量和变化模式,结果显示,Pm CDK2在斑节对虾的脑、心、淋巴、肝胰腺、性腺等组织中均有表达,其中精巢中表达量显著高于其他组织;卵巢发育阶段表达分析则显示Pm CDK2在Ⅲ期表达量最高,其次是Ⅳ期。通过原核表达技术成功获得了含有6个His标签的融合蛋白,并对融合蛋白进行Western Blot试验,初步探讨了重组蛋白表达情况。结果表明,Pm CDK2基因在斑节对虾卵巢发育过程中可能发挥了重要作用,该结果对进一步探究斑节对虾卵巢发育机理提供了一定的理论依据。