文献类型： 中文期刊

作者： 王玉华 ¹ ; 张秀海 ² ; 吴忠义 ² ; 杨清 ¹ ; 陈国强 ³ ; 吴琼 ³ ; 黄丛林 ² ;

作者机构： 1.南京农业大学生命科学学院

2.北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心

3.清华大学生物科学与技术系

关键词： 中长链羟基脂肪酸聚酯;叶绿体基因工程;转基因烟草;植物生物反应器

期刊名称： 科学通报

ISSN： 0023-074X

年卷期： 2005 年 50 卷 10 期

页码： 41-48

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 中长链羟基脂肪酸聚酯(medium-chain-length-PHAs,mcl-PHAs)属于微生物聚酯.PHA合酶(PHAsynthase,由phaC基因编码)和3-羟酰基-酰基转移蛋白-辅酶A转移酶(3-hydroxyacyl-acylcarrierprotein-coenzymeAtransferase,由phaG基因编码)是mcl-PHAs生物合成途径中的关键酶.以aadA(氨基糖苷-3′-磷酸转移酶)基因做筛选标记,分别构建了含phaC2基因的单价叶绿体转化表达载体pTC2以及同时嵌合phaC和phaG基因的双价叶绿体转化表达载体pTGC.通过PDS1000/He基因枪转化法转化烟草,获得具有壮观霉素抗性的叶绿体型转基因烟草植株,PCR和SouthernBlot结果表明,外源基因确已整合进烟草叶绿体基因组中且基本达到同质化.气相色谱法检测转基因株系中的mcl-PHAs含量最高达4.8mg/g干重,合成的PHAs单体主要成分为3-羟基辛酸(3-hydroxyoctanoate,3-HO)和3-羟基癸酸(3-dydroxydecanoate,3-HD).透射电子显微镜观察到转基因烟草叶片叶绿体中确有PHAs颗粒累积.