文献类型： 中文期刊
作者： 张碧成 1 ; 张雪寒 2 ; 何孔旺 2 ; 范红结 1 ;
作者机构： 1.南京农业大学动物医学院
2.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心
关键词： 大肠杆菌O157∶H7;标签基因;z3276基因;原核表达
期刊名称： 中国兽医学报
ISSN： 1005-4545
年卷期： 2016 年 36 卷 08 期
页码： 1354-1357
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 经BLAST分析表明,开放阅读框z3276是大肠杆菌O157∶H7独有的遗传标志性基因,编码氨基酸与大肠杆菌Ⅰ型菌毛有较高的同源性,但z3276基因编码蛋白的生物学特性尚不明确。为了明确z3276基因编码蛋白的抗原性,进一步研究其在大肠杆菌O157∶H7致病过程中的作用。采用PCR方法扩增z3276基因,去除其信号肽序列,克隆到原核表达载体pColdⅠ,转化感受态细胞BL21获得阳性重组菌,IPTG诱导表达重组蛋白,以大肠杆菌O157∶H7全菌抗血清为一抗,Western blot方法检测重组z3276蛋白抗原性。结果显示,成功构建重组菌BL21(pColdⅠ-z3276),并获得高效表达;相对分子质量33 000,占菌体总蛋白30%以上,主要以包涵体形式存在于菌体沉淀中;且与兔源全菌多克隆抗血清发生特异性反应,条带明显。
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