文献类型: 中文期刊
作者: 梅梅 1 ; 陆吉虎 1 ; 张雪花 1 ; 唐应华 1 ; 卢宇 1 ; 侯继波 1 ;
作者机构: 1.江苏省农业科学院动物免疫工程研究所;江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心;扬州大学兽医学院教育部禽类预防医学重点实验室/江苏省动物预防医学重点实验室;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
关键词: 血清4型禽腺病毒;纤突蛋白;表达;免疫原性
期刊名称: 中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2019 年 12 期
页码: 1251-1255
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为研究I群血清4型禽腺病毒(FAdV-4) fiber-2蛋白的免疫原性,本研究利用杆状病毒表达系统构建了含fiber-2基因的重组杆状病毒穿梭载体,将其转染Sf9细胞后获得重组杆状病毒rBA-fiber-2,并采用悬浮放大工艺表达重组fiber-2蛋白。通过间接免疫荧光试验(IFA)和western blot鉴定重组蛋白fiber-2的表达,并采用免疫琼扩试验(AGP)检测fiber-2蛋白效价。以fiber-2蛋白作为免疫原制备油乳剂疫苗免疫SPF鸡进行免疫效力试验,分别设fiber-2疫苗组、fiber-2疫苗配伍免疫增强剂CVCVA5组及生理盐水对照组。免疫后14 d、21 d和28 d采集SPF鸡外周血分离血清,利用AGP法检测其血清抗体水平。IFA结果显示fiber-2蛋白在昆虫细胞中获得表达;western blot结果显示该蛋白能够与FAd V-4阳性血清发生特异性免疫反应,蛋白分子量约62 ku;AGP结果显示fiber-2蛋白AGP效价达1∶16。免疫后14 d两组实验组鸡均可检测到特异性琼扩抗体,免疫后28 d fiber-2疫苗组SPF鸡抗体AGP效价平均值可达1∶24,配伍CVCVA5疫苗组SPF鸡抗体AGP效价平均值可达1∶104。以上结果表明fiber-2蛋白具有一定的免疫原性,免疫后可诱导机体产生特异性抗体,本研究为进一步研制FAd V-4亚单位疫苗提供实验依据。
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